TOXICIDADE E EFICIÊNCIA DO DIMETILSULFÓXIDO (DMSO) NO CONGELAMENTO DE CÉLULAS MADIN-DARBY BOVINE KIDNEY (MDBK)

  • Tony Picoli Universidade Federal de Pelotas
  • Jéssica Sevilha Barbosa Universidade Federal de Pelotas
  • Gilberto D'Ávila Vargas Universidade Federal de Pelotas
  • Silvia de Oliveira Hübner Universidade Federal de Pelotas
  • Geferson Fischer Universidade Federal de Pelotas

Resumo

O dimetilsulfóxido (DMSO) é um composto mundialmente utilizado como solvente orgânico que nas últimas décadas vem sendo usado na medicina principalmente como anti-inflamatório. Em laboratórios de cultivo celular é utilizado rotineiramente como crioprotetor de células e, sendo assim, objetivou-se estudar a toxicidade e eficiência no congelamento celular, em diferentes concentrações e tempos de exposição. Células da linhagem MDBK (Madin-Darby Bovine Kidney) foram cultivadas em placas de 96 cavidades e, posteriormente, DMSO em concentrações que variaram de 0,5% a 20% foi adicionado em períodos que variaram de 15 minutos a 24 horas de exposição. Após, a viabilidade celular foi avaliada pelo ensaio do 3-(4,5 dimetiltiazol-2yl)-2-5-difenil-2H tetrazolato de bromo (MTT). Concomitantemente, células MDBK cultivadas em garrafas foram tripsinizadas e congeladas com diferentes concentrações de DMSO. Após o descongelamento, foi realizada a contagem de células viáveis com azul de tripan. Os resultados obtidos não apresentaram diferença (p>0,05) entre os tratamentos utilizando-se 0,5%, 1% e 2,5% de DMSO, uma vez que a morte celular não ultrapassou 22,84% ± 3,97% com 24 horas de incubação. Porém nos tratamentos com maior concentração, com apenas uma hora de incubação, a taxa de morte celular ultrapassou os 20%, diferindo do controle (p<0,01). Após o descongelamento, o melhor protocolo foi aquele que utilizou 10% de DMSO, não diferindo do controle (p>0,05). As concentrações não tóxicas para células avaliadas pelo ensaio do MTT, não foram capazes de impedir o rompimento celular após congelamento e descongelamento. Conclui-se que é necessário o uso de crioprotetor para o congelamento, porém a adição do DMSO deve ser apenas momentos antes do congelamento devido à sua toxicidade quando incubado com as células.

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Biografia do Autor

Tony Picoli, Universidade Federal de Pelotas
Doutorando do Programa de Pós-Graduação em Veterinária UFPel, Laboratório de Virologia e Imunologia
Jéssica Sevilha Barbosa, Universidade Federal de Pelotas
Acadêmica de Medicina Veterinária UFPel
Gilberto D'Ávila Vargas, Universidade Federal de Pelotas
Professor Associado do Departamento de Veterinária Preventiva, Faculdade de Veterinária, UFPel
Silvia de Oliveira Hübner, Universidade Federal de Pelotas
Professor Associado do Departamento de Veterinária Preventiva, Faculdade de Veterinária, UFPel
Geferson Fischer, Universidade Federal de Pelotas
Professor Adjunto do Departamento de Veterinária Preventiva, Faculdade de Veterinária, UFPel
Publicado
2015-12-14
Como Citar
Picoli, T., Barbosa, J. S., Vargas, G. D., Hübner, S. de O., & Fischer, G. (2015). TOXICIDADE E EFICIÊNCIA DO DIMETILSULFÓXIDO (DMSO) NO CONGELAMENTO DE CÉLULAS MADIN-DARBY BOVINE KIDNEY (MDBK). Science and Animal Health, 3(2), 159-168. https://doi.org/10.15210/sah.v3i2.6585
Seção
Ciência Veterinária Básica